摘要
本发明属于基因工程、生物技术领域,尤其涉及一种猪圆环病毒4型环状DNA片段的构建方法、猪圆环病毒4型的制备方法及应用,将经过改造的PCV4全基因合成到pBluescript II SK(+)载体上,通过单酶切的方法把PCV4全长与pBluescript II SK(+)载体分离,利用lip2000转染试剂将PCV4首尾相连的环化DNA转染PK‑15细胞,连续传代,每代病毒分别进行WB和qPCR检测,并用第六代病毒感染PK‑15细胞,通过间接免疫荧光实验检测病毒的感染情况。本发明操作简单,为PCV4致病机制的研究及疫苗的研发奠定了基础。
技术关键词
猪圆环病毒
细胞模型
基因
质粒
环状
序列
载体
转染试剂
疫苗
位点
赋形剂
核苷酸
药物
机制
生物
基础
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