基于CRISPR-Cas12a的干细胞基因编辑系统

本发明提供了一种基于CRISPR‑Cas12a的干细胞特异性基因编辑系统，通过优化Cas12a的表达调控和递送方式，显著提高了在干细胞中的编辑效率和特异性。该系统包含：(1)经密码子优化的Cas12a核酸酶；(2)干细胞特异性启动子驱动的表达载体；(3)优化的crRNA设计策略；(4)干细胞特异性转染/递送方法。相比传统CRISPR‑Cas9系统，本发明在人类多能干细胞中展现出更高的编辑效率(提升30‑50％)和更低的脱靶率(降低60‑70％)，同时保持干细胞的自我更新和多向分化潜能。特别适用于建立疾病模型、基因治疗和再生医学应用。