基于荧光RNA适体增强CRISPR-Cas13a介导的病毒检测方法及系统

本发明公开了一种基于荧光RNA适体增强CRISPR‑Cas13a的病毒检测方法及系统(Cas13a‑FLAPs)。该系统通过以下步骤实现：1)利用DSN酶介导的靶标循环放大，选择性切割病毒RNA‑DNA杂交体中的DNA链，释放激活链；2)激活链与crRNA共同解锁Cas13a的切割活性；3)激活的Cas13a切割双B链(Bubble链和Blocker链)，释放Blocker DNA链；4)Blocker链与荧光RNA适体结合，解除其对荧光染料的淬灭，产生比率荧光信号。结合便携式设备CRISPR‑FlexiGo(CGo)，实现无扩增、单拷贝级病毒核酸检测。该方法适用于乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)等病原体，具有超高灵敏度、免扩增和现场化检测优势。