干细胞来源的胰岛β细胞制备方法

本发明提供了一种高效、可重复的干细胞来源胰岛β细胞制备方法，通过分阶段调控Wnt和Notch信号通路，结合仿生基质刚度优化培养环境，促进多能干细胞向功能性胰岛β细胞分化。具体包括：1.阶段化信号调控：在分化早期激活Wnt通路促进内胚层诱导，随后抑制Notch通路以增强内分泌前体细胞形成。2.仿生基质刚度优化：采用与天然胰岛刚度匹配的水凝胶(～1‑5kPa)模拟体内微环境，提高β细胞成熟度和功能。3.葡萄糖响应性优化：通过后期低糖/高糖交替培养，增强β细胞的葡萄糖敏感性，使胰岛素分泌量接近原生细胞水平。本方法显著提高了β细胞的产量和功能，为糖尿病细胞治疗提供了可靠的细胞来源。