特异性诱导肠上皮细胞凋亡、坏死、焦亡的小鼠模型及其构建方法

本发明涉及一种特异性诱导肠上皮细胞凋亡、坏死、焦亡的小鼠模型及其构建方法，该方法包括设计靶向Rosa26基因的第一外显子和第二外显子的sgRNA，所述sgRNA的序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；构建携带Gsdmd‑HBD、Caspase8‑ERT2、Mlkl‑ERT2融合基因的表达框，所述融合基因间通过SEQ ID NO:12所示的Linker序列连接；采用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的方式，将所述表达框整合至小鼠的Rosa26位点的第一外显子和第二外显子之间，得到基因编辑小鼠；PCR扩增及测序鉴定阳性的基因编辑小鼠与Villin‑cre+/‑小鼠交配，得到肠上皮细胞特异性表达所述融合基因的小鼠模型。该小鼠模型可以特异性诱导单一类型的肠上皮细胞死亡，并最大程度规避传统方法伴随的非特异性信号激活和复杂环境扰动。