摘要
本发明属于生物医药领域,具体公开了一种驯后间充质干细胞(MSCs)的培养方法,包括:从自体外周血分离血浆、血小板裂解液、并通过磁珠分选获得CTL及Treg;将脐带MSCs序贯共培养三代:P1代在含30%αMEM、68%DMEM/F12、1%自体血浆、1%血小板裂解液的培养基中与CTL共培养,添加0.1‑1μM白藜芦醇及10‑50μM亚精胺;P2在含50%αMEM、48%DMEM/F12、1%自体血浆、1%血小板裂解液的培养基中与Treg共培养;P3代在90%αMEM、5%DMEM/F12、5%PRP中培养收获。所得MSCs表面标志物为CD105+/CD90+/CD73+/CD45‑/CD34‑/HLA‑DR‑,且CD24表达量低(CD24low)、CD47表达量高(CD47high)、PD‑L1表达量高(PD‑L1high),IDO活性≥25U/mg,静脉移植后肺滞留率≤12%,存活周期≥28天。该细胞适用于治疗ARDS或肝纤维化。
技术关键词
自体血小板
培养基
白藜芦醇
细胞毒性T细胞
呼吸窘迫综合征
外周血
标志物
调节剂
小鼠模型
磁珠
调节性
静脉
糖蛋白
周期
吲哚
乙酰
药物
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