摘要
本发明涉及分子生物细胞培养技术领域,具体来说是一种敲除METTL14基因的放疗抵抗性肺癌细胞系的构建方法及应用。步骤包括:构建人肺癌放疗抵抗性细胞株;METTL14基因敲除靶位点的确定及gRNA的设计;根据所设计的gRNA,通过CRISPR/Cas9系统对METTL14基因进行精准高效的敲除,有效构建一种人肺癌放疗抵抗性细胞株中敲除METTL14基因的敲除型细胞系;通过检测METTL14的表达,鉴定所构建METTL14基因诱导型敲除细胞系及对照细胞系的敲除效率。本发明METTL14基因敲除型细胞系的建立,为放疗抵抗性细胞泛凋亡的研究提供了有效的细胞模型。
技术关键词
肺癌细胞系
基因
细胞株构建方法
体细胞
细胞培养技术
质粒
培养基
恒温培养箱
转染试剂
序列
细胞模型
引物
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密度
射线
位点
编码
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