一种用于生殖细胞基因特异性敲除cre工具鼠的构建方法及其应用

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种用于生殖细胞基因特异性敲除cre工具鼠的构建方法及其应用，本发明借助CRISPR‑CAS9技术将携带Ddx4启动子序列的Cre重组序列敲入到小鼠基因组安全位点Hipp11以构建Ddx4 Promoter‑Kozak‑CreERT2‑rBGpA基因敲入小鼠模型。该模型小鼠实现了CreERT2重组酶在生殖细胞特异性启动子Ddx4驱动下特异性表达的特征，表达出的CreERT2蛋白在细胞胞质与HSP90蛋白结合后处于失活，当利用他莫昔芬诱导后CreERT2解离后进入细胞核，切割Loxp序列以实现基因重组。本发明通过在基因组安全位点插入外源序列，不影响原有小鼠内源性基因的表达和功能，且不影响雌雄小鼠的生育能力，在后续用于基因敲除时具有高效、方便的优点。通过该模型小鼠有望加速解析调控小鼠配子发生基因的作用机制。