摘要
本发明公开了一种高效定向诱导IPS分化为胰岛β细胞的方法。本发明中,通过分阶段的信号调控与严格的细胞筛选,显著提升了分化的定向性与整体效率。整个过程从起始阶段就注重细胞质量控制,通过筛选形态均一、多能性标志物高表达的iPS细胞,为后续分化奠定稳定基础。各阶段采用递进式的信号分子调控,从内胚层诱导时的Activin A梯度调整,到胰腺前体细胞分化中的FGF10与视黄酸协同作用,再到内分泌前体细胞诱导时的Wnt信号抑制,形成精准的分化路径,有效减少非特异性分化倾向。同时,关键节点的细胞富集步骤,如内胚层阶段的SOX17阳性细胞筛选、内分泌前体细胞的Ngn3磁珠分选,进一步提升了目标细胞群体的纯度,避免杂细胞对后续功能成熟的干扰。
技术关键词
培养基
体细胞
阶段
刺激胰岛素分泌
内分泌
胰岛素颗粒
混合水凝胶
活细胞成像技术
控制策略
细胞接种
胎牛血清
多能性
标志物
动物模型
信号
基础
倒置显微镜
烟酰胺
形态
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阶段
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