摘要
本发明公开了一种功能性P2X1膜蛋白单克隆抗体的制备方法及其应用。通过制备具天然空间结构和活性的人源P2X1蛋白免疫小鼠;应用单克隆抗体制备技术制备获得8个功能性P2X1单克隆抗体,选择2个功能性较好的克隆进行基因测序,获得功能性可变区序列;选择功能最好的克隆,用人源Fc段替换其鼠源Fc段,制备了1个半人源化嵌合基因工程抗体,经功能验证其功能活性与原鼠源抗体相当,说明其可变区F(ab)2的序列与其功能活性具有特异相关性。功能性P2X1单克隆抗体具有抑制过表达P2X1细胞钙离子内流、抑制因P2X1过度激活致细胞功能异常、恢复被内毒素抑制的中性粒细胞的趋化功能、提高脓毒症小鼠生存率、抑制肿瘤细胞的分裂增殖和抑制荷瘤小鼠肿瘤生长的作用。
技术关键词
单克隆抗体
基因工程抗体
空间结构
序列
缓冲液
杂交瘤
膜蛋白
核苷酸
荷瘤小鼠
水溶性佐剂
细胞培养液
纯化标签
马来酸
肿瘤
模型小鼠
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