基于RPA结合CRISPR/Cas12a恒温扩增技术核酸检测系统及其检测方法与应用

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于RPA结合CRISPR/Cas12a恒温扩增技术核酸检测系统及其检测方法与应用。本发明通过将优化选择的RPA和CRISPR/Cas12a反应分离到两个不相邻的反应室中分隔进行，有助于简化操作，同时有效避免两个反应之间的相互干扰和扩增产物的污染。本发明通过设计一体化、可视化检测装置，将微流控芯片上的RPA扩增反应、CRISPR/Cas12a反应和检测结果的观察相结合，凭肉眼可直接观察到检测结果。通过设计微流控芯片将RPA和CRISPR反应检测结合在一个封闭的空间中，使加样、反应、观察等全过程实现闭管，最大限度地降低了与核酸转移相关的污染风险，具有核酸提取操作简便、耗时短、携带方便、检测可视化、密封性好的优良特性，有助于在实时现场检测中推广应用。