摘要
本专利公开了一种基于过渡态分子开关的CRISPR系统降低DNA芯片背景荧光的方法。该方法集成了微流控技术、过渡态纳米结构制备和CRISPR/Cas12a技术,降低了DNA芯片检测的荧光背景。该方法的主要特征包括:使用高度集成的过渡态分子开关简化核酸筛选步骤,产生的活性Taq DNA聚合酶用于保护信号分子,CRISPR/Cas12a识别双链DNA后同时进行信号的产生与背景的降低,降低了芯片上的荧光检测背景。过渡态分子开关和CRISPR/Cas12a的特异性识别避免了芯片上非特异性吸附的影响,增强了分析的特异性。同时,该方法具有简易可编程的特点。本发明已成功用于检测多种样本,为特异性低背景检测提供了可靠的平台。
技术关键词
DNA芯片
捕获探针
去离子水
Cas12a技术
分子
溶液
开关
基底
荧光阵列
玻璃
氮气
混合液
戊二醛
二甲基硅氧烷
聚合酶
缓冲液
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