Timd4基因过表达的山羊乳腺上皮细胞的构建方法及应用

本发明提供Timd4基因过表达的山羊乳腺上皮细胞的构建方法及应用，靶向山羊乳腺上皮细胞Timd4基因的gRNA，构建Timd4基因过表达山羊乳腺上皮细胞。该方法包括：利用基因编辑技术，将编码Timd4基因的启动子替换为内源性强表达b‑actin基因的启动子。本发明设计了特异靶向Timd4基因的gRNA，利用Cas9蛋白向Timd4基因的5’UTR前插入内源性强启动子，从而达到对乳腺上皮细胞进行基因过表达的目的。利用本发明方法得到的Timd4基因过表达的山羊乳腺上皮细胞，可有效保护乳腺上皮细胞免受LPS诱导的炎症反应。本方法提供了一种构建Timd4过表达的方法，为乳腺炎基因治疗领域提供理论支持。