摘要
本发明提供了一种成年牦牛鼻咽上皮细胞的分离培养方法,首先采集牦牛鼻咽粘膜组织,用含复合抗生素的生理盐水和含复合抗生素的PBS缓冲液进行前处理,然后按照先IV型胶原蛋白酶后胰蛋白酶对组织进行消化;利用含有复合抗生素的完全培养基重悬细胞后,将其接种于细胞培养瓶中进行培养;利用刮除法结合差速贴壁法并且配合胰蛋白酶消化液去除成纤维细胞,从而获得成年牦牛鼻咽上皮细胞;本发明提供的方法能够快速地分离出成年牦牛鼻咽上皮细胞,获得贴壁生长迅速、活力高且稳定传代的细胞;这一发明为牦牛鼻咽粘膜的生理调控和病原体感染机制研究提供了实验细胞模型,具有重要的科研价值和应用前景。
技术关键词
胰蛋白酶消化液
培养基
抗生素
细胞培养箱
细胞刮刀
细胞悬液
密封离心管
培养液
培养瓶
液压机床
胶原
组织
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