摘要
本发明提供了一种用于高通量筛选调控miR‑122表达的药物的细胞模型及其制备方法和应用。通过PCR克隆miR‑122启动子特异性序列,将miR‑122启动子和荧光素酶报告基因融合片段重组到LV6质粒载体中,构建重组质粒。再将构建的重组质粒包装到慢病毒载体,感染人肝癌细胞Huh7建立稳转细胞模型。通过检测Luc的含量来快速高效、特异性地筛选调控miR‑122表达的药物。本发明选取了特定的miR‑122启动子序列,构建了miR‑122表达水平筛选细胞模型,成功应用于筛选2543种小分子,获得了一批调控miR‑122表达的药物,实现了以miR‑122为靶点治疗脂肪肝的药物高通量筛选。
技术关键词
启动子
荧光素酶报告基因
序列
稳转细胞模型
药物高通量筛选
核苷酸
病毒载体
构建重组质粒
肝癌
引物
质粒载体
包装
慢病毒
分子
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