摘要
本发明提供了一种构建Map3k3I441M突变敲入转基因小鼠模型的方法及应用。方法包括:将小鼠的1号外显子至部分2号内含子替换为突变型基因片段,所述突变型基因片段的序列如序列表中SED ID NO:1所示;以BCA克隆为模板,扩增出含有同源臂的小鼠基因组片段,作为打靶载体;将Cas9和gRNA与所述打靶载体共同注射到受精卵中;所述受精卵经过生产,得到阳性F0代样本;将所述阳性F0代样本合笼繁殖,得到F1代样本;将所述F1代样本进行基因分型,筛选出Map3k3I441M样本;将所述F1代样本中的Map3k3I441M样本与Cdh5‑CreERT工具样本进行交配,生产F2代样本。该构建方法构建出的模型能够准确反映出小鼠体内的真实情况。
技术关键词
转基因小鼠模型
打靶载体
突变型
样本
模板
序列
人类
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