摘要
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种U87‑Cas9‑IDH1mut细胞系及其构建方法与应用。该细胞系为U87‑Cas9‑IDH1‑R132H人脑星形胶质母细胞瘤细胞株,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:65385。本发明以U87细胞为宿主细胞,通过转染含Cas9的慢病毒表达载体,经过灭瘟素筛选和阳性细胞的单克隆培养,获得稳定表达Cas9蛋白的转化体;用含IDH1mut的慢病毒表达载体转染U87‑Cas9细胞,经过潮霉素筛选得到稳定表达Cas9和IDH1mut蛋白的U87细胞系。该细胞系在基因编辑制备目标细胞株/模式动物领域具有广阔的应用前景。
技术关键词
细胞系
稳定表达Cas9蛋白
病毒表达载体
潮霉素筛选
胶质母细胞瘤
微生物菌种保藏
星形胶质
稳定表达细胞株
细胞克隆筛选
质粒
动物模型
转化体
慢病毒包装
单克隆
基因工程技术
脑胶质瘤
人脑
筛选方法
药物
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