摘要
本发明公开了一种子宫内膜细胞条件性敲除ZXDB基因小鼠模型的构建方法,包括以下步骤:设计靶向小鼠ZXDB基因的sgRNA,构建包含该sgRNA的重组载体,再通过体外转录扩增获得目的sgRNA;制备同源模板,在小鼠ZXDB基因的外显子两端添加loxP位点;将目的sgRNA、同源模板与Cas9蛋白孵育后,通过显微注射注入小鼠受精卵,然后将其移植入假孕母鼠,获得F0代小鼠;对F0代小鼠基因型鉴定,筛选出带loxP位点的阳性小鼠;将阳性小鼠与子宫内膜组织特异性Cre小鼠交配,对其子代进行基因型鉴定,得子宫内膜细胞条件性敲除ZXDB基因小鼠模型。本发明的构建方法,简单高效,制得的ZXDB基因条件性敲除小鼠模型,为研究ZXDB基因在子宫内膜组织的作用和机制提供了很好的动物模型,具有广阔的应用前景。
技术关键词
基因小鼠模型
基因条件性敲除小鼠模型
子宫
重组载体
位点
模板
单链寡核苷酸
动物模型
组织
治疗药物
蛋白
转基因
染色体
序列
机制
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