摘要
本发明公开了一种肝损伤类器官模型的构建及评价方法,包括如下步骤:(1)选用小鼠肝脏细胞,通过无菌手术技术用胰酶对小鼠灌流,去除肝脏内血液采集肝脏组织,并进行精细的酶解消化处理,以获得单细胞悬液;(2)将单细胞悬液接种于三维培养系统中,采用培养基联合生长因子和抑制小分子进行初步刺激,以促进细胞在三维空间中的生长、增殖与分化;根据细胞生长情况,适时进行传代操作,以确保肝脏类器官的持续培养和扩增;(3)将培养成熟的肝脏类器官暴露于模拟肝损伤病理环境的刺激因子中,构建不同类型的肝损伤类器官模型。本发明的肝损伤类器官模型构建方法能够在较短时间内完成模型的构建,大大缩短了研究周期,效率高,成本低。
技术关键词
类器官模型
三维培养系统
肝脏类器官
评价方法
肝损伤模型
无菌手术
HE染色切片
生化检测方法
细胞培养系统
酶联免疫法
小鼠
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