基于肠上皮特异性敲除Twist1基因的疾病模型构建方法及其在炎性肠病精准治疗中的应用

本发明涉及生物医学领域，具体涉及基于肠上皮特异性敲除Twist1基因的疾病模型构建方法及其在炎性肠病精准治疗中的应用，包括以下步骤：通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术在Twist1基因中引入loxP位点，产生可被条件性敲除的Twist1f/f小鼠；首先设计针对Twist1的gRNA和含loxP位点的供体载体，并将其与Cas9 mRNA共同注入小鼠受精卵；产生的F0代与野生型小鼠交配获得F1代Twist1f/f小鼠；F1代与表达肠上皮特异性Cre重组酶的转基因小鼠交配，最终获得肠上皮特异性敲除Twist1的转基因小鼠(Twist1‑/‑)；通过PCR、测序和蛋白质表达分析验证敲除效率。