一种靶向敲除APP基因的sgRNA及其应用

本发明公开了一种靶向敲除APP基因的sgRNA及其应用，属于动物遗传工程领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因敲除技术，通过sgRNA序列链接至PX459载体中，将PX459‑APP打靶载体转入猪成纤维细胞中，通过抗性筛选和PCR测序鉴定后获得阳性细胞克隆，再通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎；将克隆胚胎移入猪子宫内妊娠获得克隆猪。本发明首次构建APP基因敲除猪，并使APP基因不表达而获得ASFV抗性，为抗非洲猪瘟育种研究奠定基础。