摘要
本申请提供一种基于水凝胶的单细胞外囊泡携带的DNA与表面蛋白质的联合检测方法及其应用。该联合检测方法,包括提取和纯化细胞外囊泡;使用第一抗体标记细胞外囊泡表面携带的蛋白质,并用含有水凝胶的PBS稀释细胞外囊泡,生成含有细胞外囊泡的水凝胶液滴;水凝胶液滴置于微流控芯片中,清洗油相并固定在微流控芯片上,使用带有荧光标记的第二抗体与第一抗体结合;使用裂解缓冲液破坏含有细胞外囊泡的水凝胶液滴中细胞外囊泡的细胞膜,并使用含有荧光染料的MDA扩增反应混合物对细胞外囊泡内的DNA进行MDA扩增反应及鉴定DNA簇。该联合检测方法实现DNA与蛋白质的近单分子水平检测,在分析检测携带DNA和蛋白质的细胞外囊泡亚群体方面具有极高的灵敏度和准确性。
技术关键词
联合检测方法
Phi29DNA聚合酶
水凝胶
巯基聚乙二醇
荧光染料
凝胶微球
微流控芯片
抗体
液滴
肿瘤早期检测
缓冲液
丙烯酸酯
混合物
毛细管装置
标记
无细胞
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