一种突变检测在肺炎克雷伯菌替加环素耐药检测中的方法及应用

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一种突变检测在肺炎克雷伯菌替加环素耐药检测中的方法及应用
申请号:CN202510598635
申请日期:2025-05-09
公开号:CN120210399A
公开日期:2025-06-27
类型:发明专利
摘要
本发明涉及分子诊断技术技术领域,具体为一种突变检测在肺炎克雷伯菌替加环素耐药检测中的方法及应用,先取样本加含特定裂解增强剂的裂解液,37℃孵育后梯度离心取上清;接着用特殊双功能磁性纳米粒子提取核酸,洗涤后洗脱;再配置含引物、酶等的PCR反应体系,添加新型辅助因子进行扩增;然后用复合核酸染料,通过HRM技术检测突变;最后对比熔解曲线,结合机器学习算法判定样本是否耐药。本发明检测方法优势突出;创新的样本处理、核酸提取和检测步骤,提升了检测准确性和效率,能精准识别低水平耐药株;同时大幅降低成本,便于基层医院推广,对防控耐药菌意义重大。
技术关键词
热启动TaqDNA聚合酶 核酸提取 机器学习算法 肺炎克雷伯菌核酸 引物 PCR缓冲液 磁性纳米粒子 样本 巢式PCR技术 营养添加剂 抗菌药物敏感性 二硫代苏糖醇 紫外分光光度计 HRM技术 分子诊断技术 表面修饰 数据分析软件 建立预测模型
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