基于CRISPR/Cas9的JAK2 V617F突变细胞模型的构建方法及应用

本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及基于CRISPR/Cas9的JAK2V617F突变细胞模型的构建方法及应用，构建方法具体为：基于JAK2V617F突变位点设计sgRNA序列；以pX458质粒为载体构建pX458‑JAK2‑sgRNA质粒；设计ssODN‑Donor序列；将pX458‑JAK2‑sgRNA质粒和ssODN‑Dornor序列分别制成转染复合物，并转染进THP1细胞，经培养、提取、鉴定后JAK2V617F突变细胞模型构建成功。本发明不仅解决了现有技术无法构建携带JAK2V617F突变的中性粒细胞和单核细胞体外模型的问题，还深入揭示了MPN患者炎症因子异常高表达的机制，促进了新型抗炎症及抗纤维化药物的筛选与开发。