摘要
本发明公开了一种基于AAV介导免疫微环境的脑胶质瘤动物模型构建方法,包括:选择适龄的免疫缺陷小鼠;注射人源CD34+造血干细胞进行免疫系统重建;检测外周血PBMC中的人CD45+免疫细胞;选择高表达脑胶质瘤标志基因的肿瘤组织,进行快速qPCR或靶向RNA‑seq免疫组化多重验证,筛选符合的肿瘤组织;将肿瘤组织进行物理切块并经预处理液处理后,消化成单细胞悬液,接种于小鼠颅内;向小鼠尾静脉注射携带特定免疫调控基因的AAV载体,调控脑胶质瘤免疫微环境;当观察到肿瘤组织稳定生长并具有免疫细胞浸润特征时,完成脑胶质瘤动物模型的构建。与现有模型相比,本发明提供了一种更稳定、更科学、更贴近人类免疫背景的脑胶质瘤模型,适用于相关免疫治疗药物筛选及机制研究。
技术关键词
动物模型构建方法
脑胶质瘤
小鼠尾静脉注射
肿瘤
免疫缺陷小鼠
免疫细胞
检测外周血
免疫组织化学染色
造血干细胞
免疫系统
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