摘要
本发明公开了一种阿尔兹海默症细胞模型的构建方法,包括如下步骤:(1)Senecionine的配制:无菌条件下,称取Senecionine粉末,用5%的无菌盐酸水溶液充分旋涡溶解,加1mM NaOH调节至pH=6‑7,配制500mM的Senecionine储备液;(2)细胞培养:SH‑SY5Y细胞培养于MEM/F‑12完全培养基中,置于5% CO2、37℃培养箱内培养,完全培养基为44% MEM+44% F‑12+10% FBS+1% P/S+1% 谷氨酰胺;(3)细胞处理:取对数生长期的SH‑SY5Y细胞,调整细胞密度以每孔50000个细胞的密度接种于6孔板中,放入培养箱,每孔加入100μL浓度为42‑84μM的Senecionine溶液,当细胞融合度至58%‑60%时,进行换液处理,继续培养48h。本发明首次使用Senecionine进行阿尔兹海默症(AD)的细胞模型构建,且使用的细胞是SH‑SY5Y,Senecionine使用浓度是42‑84μM,培养48小时可成功构建阿尔兹海默症的细胞模型。
技术关键词
阿尔兹海默症
细胞模型
培养基
培养箱
溶液浓度梯度
无菌条件
密度
旋涡
酶标仪
盐酸
粉末
基础
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