一种基于RPA-CRISPR/Cas12a-LFS的猪源性成分一体式快速检测芯片的制备方法

本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a‑LFS的猪源性成分一体式快速检测芯片的制备方法，包括以下步骤：将猪肉以不同比例混合到牛肉中制备掺假牛肉样品，并用微针快速一步法提取肉类样品DNA；设计并筛选RPA引物，进行RPA扩增反应；基于RPA产物设计crRNA，进行CRISPR/Cas12a反应；设计NAHLFS上的质控和检测探针，制备红色金纳米粒子，将金纳米粒子与探针连接，组装NAHLFS；设计制作微流控芯片，将RPA、CRISPR、NAHLFS三个过程集成到芯片上；在微流控芯片上加装恒温加热装置。本发明制备的RPA‑CRISPR/Cas12a‑LFS微流控芯片可以特异性的检测肉制品中的猪源性成分；检测过程中操作简单、成本低廉，不需要专业的实验室和昂贵的设备仪器，非常适合于现场快速检测。