摘要
本发明公开一种猪形成态多能性胚胎干细胞的建系方法,属于细胞生物学技术领域。为了获得稳定传代的猪形成态多能性胚胎干细胞系。本发明提供一种猪形成态多能性胚胎干细胞的建系方法,取猪孤雌激活囊胚、猪体外受精囊胚或猪体内囊胚接种于预先铺有饲养层细胞的pFESCM培养基,培养基每两天更换一次,直至生长晕直径达到100~500μm,将细胞吹散成单细胞或3~4个细胞的小团块,并重新接种于预先铺有饲养层细胞的pFESCM培养基中,继续培养2~4天,获得第一代猪形成态多能性胚胎干细胞,经过传代到8代获得稳定遗传的细胞系。制备的胚胎干细胞用于育种繁育、基因编辑、动物克隆、医学模型、药物开发载体和诱导生产生殖配子。
技术关键词
囊胚
猪体外受精
培养基
培养液
丙酮酸钠
细胞生物学技术
胚胎干细胞系
细胞培养皿
小鼠品系
医学模型
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消化液
人类
密度
编辑
基因
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