摘要
本发明公开了一种PABPC1基因敲除的MDCK细胞系及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9技术,通过在PABPC1基因的exon2和exon6上下游各设计1个靶点,运用gRNA‑A1和gRNA‑A2将禽流感疫苗生产用细胞系MDCK中的PABPC1基因敲除了5065个碱基,成功构建了PABPC1基因敲除的MDCK细胞系。在PABPC1敲除的MDCK细胞系中,禽流感病毒复制速率明显加快,且PABPC1敲除后对细胞生长速率无显著影响。本发明对提高禽流感疫苗生产效率,降低疫苗生产成本具有重要作用。
技术关键词
PABPC1基因
基因敲除载体
细胞系
禽流感疫苗
禽流感病毒复制
敲除模型
基因工程技术
核苷酸
序列
速率
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