摘要
本发明公开了无需编码微珠配对的高通量单细胞转录组测序微流控芯片,包括抽真空盖部、微通道部和微井部。通过在大规模微井阵列中微井的底部共价连接核苷酸序列,得到特异性分子条形码阵列用以捕获mRNA。并通过向微通道中通入细胞悬液,使得细胞在重力作用下沉积入微井中,实现单细胞的分离。加冻融裂解液使得被微井捕获的细胞裂解后,细胞释放的mRNA被微井底部的核苷酸序列捕获,实现mRNA的固相捕获与标记。本设计使用的固相捕获方式革新了传统的编码微珠与细胞配对隔离以溯源单细胞转录组的方法。这一创新性方法的使用彻底突破了细胞和微珠在捕获以及配对时的随机性,彻底摆脱了泊松分布的限制,极大减少了试剂的浪费,提升了mRNA捕获的效率。
技术关键词
微流控芯片
通孔
通道
核苷酸
衬底层
阵列
分隔墙体
捕获结构
盖部
序列
编码
流道
聚二甲基硅氧烷
光刻材料
细胞悬液
单细胞转录组
创新性方法
分子条形码
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