摘要
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及胰岛β细胞特异性敲除Osgep基因的小鼠模型的构建方法及应用。所述构建方法包括以下步骤:1) 根据Osgep基因的结构确定敲除区域为第2、3号外显子区域,Osgep基因转录本的CDS序列如SEQ ID NO.1所示,设计两端连接flox位点且包含敲除区域序列的基因片段,并将此片段插入质粒中;2) 根据敲除区域的上游序列和下游序列设计sgRNA;3) 将sgRNA、Cas9酶和质粒混匀后,一同注射进入小鼠受精卵的胞浆内,构建编辑的小鼠受精卵产出F0代小鼠。本发明研究发现Osgep敲除小鼠可用于糖尿病的研究,以及Osgep基因可以起到治疗糖尿病小鼠的作用。
技术关键词
小鼠模型
敲除小鼠
序列
质粒
小鼠胚胎干细胞
基因工程技术
剪切技术
载体
病毒
编辑
位点
药物
标签
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