在中性粒细胞的线粒体特异性表达、实时监测氧化还原状态的转基因斑马鱼模型的制备方法

本发明公开了一种在中性粒细胞的线粒体上特异性表达实时监测氧化还原状态的转基因斑马鱼模型的制备方法：S1、制备骨架质粒mini Tol2；从斑马鱼的基因组扩增获得线粒体定位序列MLS片段；扩增获得氧化还原敏感的绿色荧光蛋白2片段roGFP2；S2、通过无缝克隆技术，将骨架质粒mini Tol2与MLS、roGFP2两个片段连接成一个质粒，得到重组表达载体；S3、胚胎显微注射、筛选转基因斑马鱼，得到F0代；S4、获得转基因斑马鱼模型。所得的转基因斑马鱼品系可用于斑马鱼中性粒细胞线粒体的功能研究，利用感应氧化还原状态的绿色荧光蛋白在活体鱼中的表达可以随时观察在任何时期反映机体对氧化应激的表现。