摘要
本发明适用于细胞模型技术领域,提供了一种建立猪鼻粘膜M细胞分化模型的方法,包括以下步骤:猪鼻粘膜上皮细胞的准备;pGEX‑6p‑1‑RANKL重组表达载体的构建及原核表达;猪源RANKL诱导猪鼻粘膜上皮细胞分化为M细胞;RT‑qPCR检测M细胞分化相关基因Spi‑B、Tnfaip2和GP2的表达情况。本发明成功构建了功能性猪源RANKL重组蛋白,并利用其成功诱导了猪鼻粘膜上皮细胞分化为M细胞。通过RT‑qPCR实验,精确检测了M细胞相关基因的表达水平,验证了分化效率。这一成果不仅为猪呼吸道疾病研究、药物疫苗开发提供了工具,同时促进了跨物种粘膜免疫研究,为粘膜免疫领域带来了新视角和实验工具。
技术关键词
考马斯亮蓝染色
重组表达载体
特异性PCR引物
细胞模型技术
固体培养基平板
原核表达质粒
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基因
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