一种基於对称条码PCR扩增与LAMBDA核酸外切酶的核酸检测方法及反应体系

本发明属於分子生物学检测技术领域，提供了一种基於对称条码 PCR 扩增与 Lambda 核酸外切酶的核酸检测方法及反应体系。针对现有芯片杂交技术在多重靶标核酸检测中存在的灵敏度低、特异性差等技术问题，本发明通过引入对称条码 PCR 扩增技术，其中一条引物带有 5'端磷酸化修饰和通用序列标记，扩增後采用 Lambda 核酸外切酶选择性降解磷酸化链，获得高纯度单链 DNA 产物。该单链 DNA 产物随後与芯片上的捕捉探针和带有金颗粒的检测探针进行三明治杂交，通过银染显色实现检测。该方法通过 PCR 扩增与酶切消化的协同作用，显着提高了芯片杂交反应的灵敏度和特异性，适用於病原体检测、基因突变分析及多重靶标并行检测。