摘要
本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的卵巢癌BRCA1突变细胞模型的构建方法及应用。本发明采用CRISPR/Cas9技术构建卵巢癌BRCA1(c.5091 T>A和c.5521 del)内源点突变细胞模型,并采用多次转染或通过干扰错配修复通路关键因子MLH1在卵巢癌细胞中优化CRISPR/Cas9编辑BRCA1的实验条件,提高突变率。本发明通过内、外源突变联合的方式,共同验证了BRCA1新型突变c.5091 T>A和c.5521del可增加卵巢癌细胞对卡铂的敏感性,干扰卡铂敏感基因的表达。本发明为卵巢癌精准诊疗和预后评估提供了理论和实验基础,有利于帮助解决更多的临床问题。
技术关键词
细胞模型
重组载体
细胞系
点突变
序列
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基础
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