摘要
本发明属于基因工程技术领域,涉及一种快速降解MSTN蛋白的小鼠模型的构建方法,包括:在Donor载体上依次接入5’同源臂、3xEAAAK、FKBP1A基因同义突变序列、3xEAAAK、红色荧光蛋白mCherry序列和3’同源臂,得到Donor重组载体;基于Mstn基因的第三外显子设计gRNA,将gRNA、Cas9蛋白和Donor重组载体混合后注射到小鼠受精卵,体外培养,移植,得到F0代小鼠;将F0代小鼠与野生型杂交,或者将杂交后代继续配繁,获得敲入小鼠模型。本发明利用dTAG靶向蛋白降解技术,将所得纯合敲入小鼠进行dTAG给药,可以实现对MSTN蛋白快速、可逆的降解与清除。
技术关键词
红色荧光蛋白
重组载体
小鼠模型
序列
核苷酸
野生型小鼠
基因工程技术
降解技术
融合蛋白
引物
染色体
质粒
混合物
模板
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