基于结构导向的PAM识别关键域祖先序列重建的Cas9蛋白及制备方法

本发明提供一种基于结构导向的PAM识别关键域祖先序列重建的Cas9蛋白及制备方法，通过整合结构同源搜索、多维度序列对齐进行祖先序列重建，优化基因编辑工具SpaCas9的PAM识别关键域并扩展其识别范围的技术，基于PID的结构信息，进行结构同源筛选，突破序列相似性限制，识别功能同源蛋白。将具有功能同源但不同PAM识别偏好的蛋白的PAM识别关键域进行祖先重建，得到能够兼容更多PAM的变体。