摘要
本发明公开一种具有抑制新冠刺突蛋白活性的蟾皮硫酸类肝素的制备及其应用。干蟾皮粉碎、水浴加热溶胀后用碱性蛋白酶酶解,经过醇沉、阴离子交换柱纯化、透析、冷冻干燥得蟾皮糖胺聚糖粗提物;利用硫酸软骨素ABC酶酶解蟾皮糖胺聚糖粗提物,经过凝胶色谱柱纯化、除盐、冷冻干燥得蟾皮硫酸类肝素。该蟾皮硫酸类肝素平均分子量11Kda,由己糖醛酸与葡萄糖胺以1‑4糖苷键连接的二糖单元组成成,其中己糖醛酸C‑2‑氧位、葡萄糖胺的C‑6‑氧位和N‑位点的总硫酸化程度分别为11.45%、33.68%和46.46%。该蟾皮硫酸类肝素具有竞争性抑制新冠刺突蛋白与肝素的结合活性,可预防新冠病毒的初期感染。本发明为蟾皮在开发新的临床用途奠定重要基础。
技术关键词
硫酸类肝素
阴离子交换柱
硫酸软骨素
碱性蛋白酶
凝胶色谱柱
糖醛酸
干蟾皮
再生芯片
缓冲液
受体
平衡液
透析膜
粉末
位点
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