摘要
本发明涉及一种单细胞蛋白电泳多色方法,本发明首先利用偶联剂将二抗与寡核苷酸标签进行偶联;其次,将细胞悬液滴加到凝胶芯片并经电泳、紫外光照固定后,加入一抗用于结合细胞悬液中的靶标蛋白,加入偶联后的二抗与寡核苷酸标签用于结合一抗,再加入成像基团,利用成像基团中的寡核苷酸短链与寡核苷酸标签中的重复序列进行互补结合,实现荧光成像;最后,加入竞争序列,利用成像基团中的寡核苷酸短链与寡核苷酸标签是不完全互补配对的,而竞争序列与成像基团中的寡核苷酸短链是完全互补配对,具有更强的亲合能力,完成荧光信号淬灭。本发明解决了抗体剥离困难,难以进行多靶标检测等问题,使得荧光淬灭效率达到95%以上。
技术关键词
寡核苷酸
基团
成像
标签
偶联剂
荧光
芯片
紫外光
聚乙二醇化
二硫苏糖醇
凝胶
马来酰亚胺
细胞悬液
重复序列
蛋白
靶标
琥珀酸
小鼠
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